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FSH elisa 試劑盒樣本的處理和操作步驟

點擊次數(shù):900次 更新時間:2019-09-16

   FSH elisa 試劑盒技術(shù)原理:

  (1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
  (2). 結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。
  (3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
  (4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
  (5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
  (6). 加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。
  FSH elisa 試劑盒標本的處理:
 ?。?)細胞培養(yǎng)上清液
  根據(jù)需要用試劑盒中的標準稀釋液稀釋樣品,然后按照說明書所述方法檢測。稀釋濃度是稀釋5倍。
  (2)腦脊液
  根據(jù)需要用試劑盒中的標準稀釋液稀釋樣品,然后按照說明書所述方法檢測。稀釋濃度是5倍。
 ?。?)血漿
 ?、儆肊DTA2K離心收集在真空血液收集管中的血液,5,000×g,15分鐘,4℃,分離血漿樣品,然后儲存在零下80℃直到使用。
  ②用試劑盒中的標準稀釋液5倍稀釋血漿以避免血漿中的干擾物質(zhì)影響檢測,按照說明書方法檢測。
  FSH elisa 試劑盒操作步驟:
  1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
  2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
  3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
  4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
  5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
  6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
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